date:2025-12-24 14:17:06
在細胞生物學(xué)、免疫學(xué)及藥物篩選等研究領(lǐng)域，科研人員常常面臨一個共性挑戰(zhàn)：如何在不同的實驗基底(如特殊包被的玻片、薄層材料或定制化表面)上，建立一套既便捷又標準化的流程，以支持細胞培養(yǎng)與后續(xù)分析?傳統(tǒng)方法往往受限于固定規(guī)格的培養(yǎng)皿或孔板，靈活性與經(jīng)濟性不足。
針對這一需求，可拆卸式臨時腔室技術(shù)提供了一套標準化解決方案。以ibidi的可移除硅膠腔室為例，該技術(shù)允許使用者在任意平整、潔凈的基底上精確創(chuàng)建臨時性、且兼容后續(xù)分析的培養(yǎng)環(huán)境。 一種創(chuàng)新的實驗方案是采用可拆卸式硅膠腔室系統(tǒng)，例如ibidi的可移除腔室（包括Culture-Inserts和Removable Chambers系列）。其核心優(yōu)勢在于高度靈活性與流程整合性。用戶可將生物相容性硅膠腔室直接粘附于幾乎任何平坦、清潔的基底上，無需膠水，即時創(chuàng)建獨立、邊界清晰的培養(yǎng)腔室。這不僅實現(xiàn)了試劑的微量使用（節(jié)省珍貴抗體或基質(zhì)膠），更關(guān)鍵的是，在完成細胞培養(yǎng)、刺激、染色等全套流程后，可輕松移除硅膠腔室而不留殘膠，從而將完整的樣品層（如已染色的細胞）無干擾地暴露出來，便于進行后續(xù)的顯微成像、長期存檔或與其他分析技術(shù)對接。 為將上述靈活理念與標準化、高質(zhì)量的產(chǎn)品相結(jié)合，ibidi推出了系列化的“可拆卸腔室載玻片”。下面以3孔可移除腔室載玻片（3 Well Chamber, removable，貨號:80381）為例，進行全方位介紹。 1. 產(chǎn)品設(shè)計理念：一體化工作流程 該產(chǎn)品旨在將細胞培養(yǎng)、固定、染色和高分辨率成像整合于單張標準顯微鏡載玻片（26 x 76 x 1 mm）上，完全避免了細胞轉(zhuǎn)移步驟，既節(jié)省時間與成本，也最大程度減少了因轉(zhuǎn)移造成的細胞損傷或丟失風(fēng)險。
2. 核心結(jié)構(gòu)與規(guī)格 * 主體結(jié)構(gòu)：一個自粘性、可整體移除的硅膠密封墊（gasket），內(nèi)含3個獨立腔室，預(yù)裝在標準玻璃載玻片上。 * 腔室尺寸：每個腔室內(nèi)部尺寸為16.5 mm x 16.5 mm x 8.0 mm（寬 x 長 x 高）。 * 工作面積與容積：每個腔室提供1.66 cm² 的生長面積，最大工作容積約為1100 µl。在染色階段使用專用Ø 15 mm蓋玻片（ibidi,貨號:10815）時，試劑容積可顯著減少至約150 µl，極大地節(jié)約了昂貴抗體或染料的使用量。 * 底部基底：為標準厚度（1 mm）的高品質(zhì)玻璃，兼容所有正置和倒置顯微鏡的高分辨率成像（包括寬場熒光、共聚焦顯微鏡）。需注意，原裝玻璃表面為疏水性，如需細胞良好貼壁，建議根據(jù)細胞類型進行包被（如多聚賴氨酸、膠原蛋白等）。
3. 關(guān)鍵技術(shù)優(yōu)勢與實驗靈活性 * 可拆卸設(shè)計： - 高通量染色：進行免疫熒光染色時，可將整個硅膠腔室從玻片上移除，隨后將多張已培養(yǎng)細胞的裸玻片集中放入染色缸進行批處理，大幅提升效率。 - 獨立孔操作：也可保留腔室在位，便于對各孔進行不同的實驗處理或染色。 * 優(yōu)異的成像兼容性：使用配套的專用蓋玻片封片后，樣品可直接用于正置或倒置顯微鏡的觀察，并獲得無光學(xué)畸變的高質(zhì)量圖像。 * 長期保存：封片后的樣品可使用兼容的封片劑（如ibidi封片劑或含DAPI的ibidi封片劑）進行長期保存。 * 基底靈活性（擴展應(yīng)用）：正如其技術(shù)理念所展示，該硅膠腔室不僅限于原裝玻片，亦可被小心轉(zhuǎn)移并粘附于其他用戶自備的平整、潔凈基底上，為在特殊材料上進行細胞實驗提供了可能。 4. 典型應(yīng)用場景 * 免疫細胞化學(xué)（ICC）/免疫熒光（IF）：是最主要的應(yīng)用，尤其適合需要保留原始生長位置進行多指標染色的實驗。 * 活細胞成像與固定后成像：一體化的設(shè)計適合進行時間序列觀察后再固定染色。 * 細胞共培養(yǎng)或條件測試：多個獨立腔室便于設(shè)置重復(fù)組或不同處理組。 5.實驗示例 在ibidi12孔可移除腔室中培養(yǎng)的小鼠腦微血管內(nèi)皮原代細胞（pMBMECs）的免疫熒光染色。紅色標記了標記緊密連接蛋白（ZO）-1的內(nèi)皮細胞連接處，突顯其成熟狀態(tài)。藍色顯示DAPI染色的細胞核。圖像使用尼康Eclipse顯微鏡的20倍物鏡采集。數(shù)據(jù)由Sidar Aydin, Britta Engelhardt, Ruth Lyck，瑞士伯爾尼Theodor Kocher研究所提供。 創(chuàng)新應(yīng)用 一種可在任意基底上創(chuàng)建臨時培養(yǎng)腔室的技術(shù)研究 人員可通過使用ibidi硅膠培養(yǎng)插片與可拆卸腔室，在任意基底上創(chuàng)建尺寸精準的臨時培養(yǎng)腔室。硅膠材料可按需裁剪，并能直接粘附，無需額外使用粘合劑。借助這些靈活的即時孔板，僅需少量試劑即可實現(xiàn)精確且空間可控的包被、培養(yǎng)與染色操作。之后，腔室可被完整移除且不留任何殘留，從而完好保存樣品以供后續(xù)分析。這種簡便的技術(shù)使得在各種材料上進行細胞培養(yǎng)變得輕松而可靠。 ibidi可拆卸式腔室載玻片（Removable Chambers系列以3孔為例）是該技術(shù)理念的標準化體現(xiàn)，成功將臨時腔室的靈活性與標準化耗材的可靠性、便捷性融為一體。其核心優(yōu)勢在于通過 “培養(yǎng)–染色–成像”一體化的設(shè)計，在單張玻片上完成全流程實驗，不僅優(yōu)化了操作步驟，其獨特的可拆卸硅膠結(jié)構(gòu)更賦予了實驗設(shè)計高度的自由度——既支持高效率的批量處理，也允許在非標準基底上進行探索性研究。 從根本上說，這項技術(shù)為跨材料、多步驟的細胞實驗構(gòu)建了一個可靠且靈活的實驗框架。它通過簡化操作、大幅減少試劑消耗、并徹底避免細胞轉(zhuǎn)移帶來的損傷或變異風(fēng)險，顯著提升了活細胞與固定細胞實驗的嚴謹性和結(jié)果可重復(fù)性。 研究人員可根據(jù)實驗所用的基底類型、通量需求與分析目標，靈活選擇適配的腔室規(guī)格（如3孔、8孔或12孔），在標準化操作與自主設(shè)計之間取得最佳平衡。這使其成為一款兼具嚴謹性、靈活性及經(jīng)濟性的實用工具，幫助研究者在多樣化的實驗設(shè)計中，更精準地控制細胞微環(huán)境，最終獲得可靠、可重復(fù)的高質(zhì)量數(shù)據(jù)。
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